PPGCS/CCBS

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: LETICIA PRINCE PEREIRA PONTES
DATA: 30/06/2015
HORA: 09:00
LOCAL: SALA 01 - PPGCS
TÍTULO: Potencial do polissacarídeo isolado do mesocarpo de Attalea speciosa Mart. ex Spreng (babaçu) na ativação de linfócitos em modelo de Tumor Ehrlich
PALAVRAS-CHAVES: Attalea speciosa Mart. ex Spreng, polissacarídeo, antitumora
PÁGINAS: 118
GRANDE ÁREA: Ciências Biológicas
ÁREA: Imunologia
RESUMO: Os polissacarídeos provenientes de fontes naturais são capazes de estimular o sistema imunológico, participando tanto na ativação da imunidade inata como adaptativa, podendo ser empregados como modificadores da resposta biológica em terapia antitumoral. No Maranhão, a farinha do mesocarpo de Attalea speciosa Mart. ex Spreng conhecido pela população como babaçu apresenta uma constituição rica em carboidratos demonstrando propriedades imunomodulatórias. Para melhor elucidar o papel imunomodulador do mesocarpo de babaçu na atividade antitumoral, este estudo investigou os efeitos da capacidade dos polissacarídeos de Attalea speciosa Mart. ex Spreng em modelo de tumor de Ehrlich. O polissacarídeo foi obtido do pó do mesocarpo de babaçu à extração aquosa sob aquecimento na relação 1:120 (droga: solvente). O extrato aquoso foi centrifugado e o sobrenadante foi concentrado em rotaevaporador. Para isolamento, o polissacarídeo, foi precipitado com etanol PA (3:1 v/v) e dialisado em membrana de 12kDa. Para determinação dos carboidratos totais, foram realizados testes químicos qualitativos e Cromatografia de Troca Iônica de Alta Eficiência (HPAEC/PAD). Na avaliação da atividade antitumoral foram utilizados tumor de Ehrlich no ensaio in vitro de citotoxicidade e in vivo utilizando camundongos da linhagem Swiss, separados em três grupos (n=10/grupo), inoculados subcutâneos 5.106 das células tumorais, na orelha esquerda. O tratamento intralesional foi feita em três dias (3ᵒ, 6ᵒ e 9ᵒ dia), com solução tampão fosfato no grupo controle negativo (CTL-), com Ciclofosfamida dose de 25mg/kg no grupo controle positivo (CTL+) e com a Fração Polissacarídica na dose 25 mg/kg no grupo experimental (FP). O desenvolvimento do tumor sólido foi avaliado no período de 12 dias com a determinação da área do tumor. No décimo segundo dia, os animais foram eutanasiados e realizado a avaliação fenotípica de células imunes infiltradas no tumor e no linfonodo drenante. A dosagem das interleucinas 2, 6, 10 e 17, fator de necrose tumoral e interferon gama foi realizado no soro dos animais. Os resultados demonstraram que no extrato aquoso há presença de glicose, frutose, sacarose e polissacarídeo. Na avaliação in vitro a FP apresentou citotoxicidade com IC50 de 43μg/ml e 35μg/ml em 2h e 4h, respectivamente. No ensaio in vivo, o desenvolvimento do tumor após tratamento mostrou que os grupos tratados com FP e CTL+ apresentaram uma redução significativa da área do tumor quando comparados ao CTL-. Na fenotipagem de linfócitos obtidos do tumor, foi observado que apesar de não ter diferença significativa na população de linfócitos T, houve um aumento na razão entre as células CD4+ em relação as células CD8+ no grupo FP, quando comparado ao CTL-. Houve também uma frequência maior na população de linfócito citotóxico ativados nos grupos FP e CTL+ quando comparado ao CTL-. No linfonodo, houve uma diminuição nas subpopulações de linfócitos no grupo FP, entretanto a razão CD4+em relação a CD8+ foi maior que no CTL-. Ao avaliar a expressão do Complexo principal de Histocompatibilidade classe-II (MHC-II) em linfócitos B não foi observado diferença na frequência de células CD19+ I-A/I-E+, entretanto houve uma redução na intensidade de expressão do I-A/I-E nos linfócitos B obtidos do grupo CTL+ quando comparados aos grupos FP e CTL. Ao avaliar as citocinas no soro dos animais, a produção de TNF-α foi maior no grupo FP quando comparado ao CTL-. Os dados mostraram que FP tem um efeito imunomodulador, com capacidade de induzir a ativação de linfócitos citotóxicos infiltrado no tumor e de elevar TNF-α, sugerindo uma ação efetora que pode se contrapor aos mecanismos de evasão tumoral, corroborando com os estudos que demonstram o potencial imunomodulador do mesocarpo de babaçu.
MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 3300875 - ANA PAULA SILVA DE AZEVEDO DOS SANTOS
Externo à Instituição - ANGELA FALCAI - UNICEUMA
Interno - 1368781 - FLAVIA RAQUEL FERNANDES DO NASCIMENTO
Interno - 6662916 - MARIA NILCE DE SOUSA RIBEIRO