PPGCS/CCBS

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: HIRAN REIS SOUSA
DATA: 24/06/2016
HORA: 14:00
LOCAL: SALA 01 - PPGCS
TÍTULO: Investigação da atividade anti-agregante plaquetária in vitro de peptídeos inibidores da dissulfeto isomerase proteica – etapa 2
PALAVRAS-CHAVES: proteína dissulfeto isomerase. integrina αIIbβ3. inibidores da PDI. agregação plaquetária.
PÁGINAS: 52
GRANDE ÁREA: Ciências da Saúde
ÁREA: Farmácia
RESUMO: Investigações recentes têm enfatizado a importância de mecanismos redox na modulação da função plaquetária. A superfície da plaqueta contém grande variedade de integrinas e outras moléculas receptoras que possuem tióis funcionais em sua estrutura, os quais são alvos potenciais de regulação redox. Dentre estas várias proteínas tiólicas, a integrina αIIbβ3 destaca-se por ser a via de convergência da ativação plaquetária induzida por diversos agonistas. A ativação da integrina αIIbβ3 é catalisada pela proteína dissulfeto isomerase (PDI), essencial à mudança de conformação com exposição do sitio de ligação ao fibrinogênio. Sendo assim, a PDI tem se mostrado como um alvo importante para o desenvolvimento de fármacos reguladores da agregação plaquetária. Nos últimos anos, diversos estudos têm descrito substâncias de origem vegetal, animal e sintéticas que são capazes de inibir a PDI. Em trabalho recente, nosso grupo de pesquisa demonstrou o papel de três peptídeos sintéticos sobre a atividade redutase da PDI: o peptídeo CxxC (VEFYAPWCGHCK), possui o motivo redox da PDI na sua sequência original WCGHCK (CXXC); o AxxA (VEFYAPWAGHAK), possui a mesma sequência de aminoácidos do primeiro, porém, com as cisteínas substituídas por alanina e o Scr (FCYPKACEWGHV), peptídeo controle onde mesmos aminoácidos do peptídeo CxxC estão em sequência aleatória e cujas cisteínas não formam um ditiol. Neste trabalho, pretendemos continuar a avaliação dos efeitos dos peptídeos sintéticos nos mecanismos redox envolvidos na agregação plaquetária, para tanto, incubamos lavado de plaquetas humanas com o peptídeo CxxC nas concentrações de 3, 6 e 10 µM, resultando em inibição concentração-dependente da agregação ativada por trombina (0,02 U/mL) em 25, 60 e 74 %, respectivamente, com IC 50 de 6,13 1,09 µM. A presença dos peptídeos controle (AxxA e Scr) não produziu quaisquer efeitos inibitórios. Da mesma forma, a análise da expressão de antígenos de superfície plaquetários mostrou uma redução de até 23% da expressão da integrina αIIbβ3 ativa. A análise da interação da proteína dissulfeto isomerase humana recombinante (hPDI) com os peptídeos mostrou uma interação da hPDI com o peptídeo CxxC, não interagindo com os demais peptídeos. Estes resultados comprovam que o peptídeo CxxC atue inibindo a PDI e mostra-se como potencial fármaco ao controle trombogênico.
MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 3300875 - ANA PAULA SILVA DE AZEVEDO DOS SANTOS
Interno - 000.000.000-00 - ANDRÉS TROSTCHANSKY - URep
Externo à Instituição - MARCELO LARAMI SANTORO - IB/SP
Interno - 1136091 - PAULO VITOR SOEIRO PEREIRA