PPGCS/CCBS

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: JANAINA VASCONCELOS GOMES
DATA: 03/12/2018
HORA: 14:00
LOCAL: SALA 02 - PPGCS
TÍTULO: Ação da serinoprotease PIC produzida por Escherichia coli sobre proteínas da matriz extracelular e da cascata de coagulação sanguínea.
PALAVRAS-CHAVES: Pic; matriz extracelular, cascata de coagulação.
PÁGINAS: 52
GRANDE ÁREA: Ciências Biológicas
ÁREA: Microbiologia
RESUMO: A serinoprotease Pic (protein involved in colonization) é uma proteína autotransportadora identificada em E. coli enteroagregativa (EAEC), Shigella flexneri e Citrobacter rodentium. Dentre os papéis biológicos para Pic já foram descritos, hemaglutinação, atividade mucinolítica, degradação do fator V da cascata de coagulação e clivagem de glicoproteínas de superfície de leucócitos, que estão envolvidas no tráfico, migração e inflamação. Nosso grupo de pesquisa já demonstrou a sua atuação no sistema complemento humano o que confere a essas bactérias a capacidade de driblar os mecanismos de defesa do sistema imune inato favorecendo, desta forma, o desenvolvimento e manutenção do quadro de sepse. Devido a essas habilidades, levantou-se a hipótese de que Pic teria ação sobre outras moléculas importantes do hospedeiro como as proteínas envolvidas com a com a cascata de coagulação sanguínea e moléculas da matriz extracelular. Desta forma, o objetivo deste estudo foi investigar a ação da serinoprotease Pic sobre componentes da matriz extracelular e da cascata de coagulação sanguínea. Para isso, sobrenadantes de cultura de E. coli produtora de Pic (HB101/Pic) e não produtora de Pic (HB101), bem como BSA foram incubados em diferentes tempos com diversas moléculas da cascata de coagulação sanguínea (plasminogênio, fibrinogênio e fibrina) e da matriz extracelular (colágeno tipo I, colágeno tipo IV, decorina, laminina e fibronectina plasmática) para avaliar tanto uma possível ligação como a degradação destes componentes. Além disto, foi realizado também um ensaio de ativação da plasmina, uma vez que esta é uma molécula chave na formação de coágulos e na ativação de outras vias do sistema imune. Desta forma, foi possível observar que o sobrenadante de cultura de HB101/Pic foi capaz de se ligar a diversas moléculas da matriz extracelular, de maneira significante, tais como colágenos tipo I e IV, laminina e fibronectina. Ao incubar a proteína Pic com moléculas da coagulação sanguínea não foi possível observar ligação com nenhum dos componentes testados em nenhuma das condições analisadas. Contudo, a proteína foi capaz de clivar o plasminogênio, sem clivar os demais componentes tanto da cascata como da matriz extracelular. Além disso, a plasmina, produto do plasminogênio, continuava ativa. Acreditamos que a bactéria E. coli produtora de serinoprotease Pic liga-se à matriz extracelular por meio de diversos componentes, facilitando assim o processo infeccioso no hospedeiro. Pic também promove ativação da plasmina, o que contribui para um efeito sinérgico na degradação de moléculas do sistema complemento, bem como para ativação desregulada e aumentada da cascata de coagulação sanguínea.
MEMBROS DA BANCA:
Externo à Instituição - LUIS CLAUDIO NASCIMENTO DA SILVA - UNICEUMA
Interno - 2583080 - MARCIA CRISTINA GONCALVES MACIEL