Banca de DEFESA: ELIZANGELA ARAUJO PESTANA MOTTA
2020-07-30 15:32:17.931
Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: ELIZANGELA ARAUJO PESTANA MOTTA
DATA: 03/08/2020
HORA: 15:00
LOCAL: Defesa on-line
TÍTULO: ATIVIDADE ANTI-Candida DE Vismia guianensis (Aubl.) Chosy in
vitro, in vivo e in silico.
PALAVRAS-CHAVES: Candida albicans; Candida glabrata; Fluconazol; CaCYP51; Vismia
guianensis, Vismiona.
PÁGINAS: 154
GRANDE ÁREA: Ciências Biológicas
ÁREA: Imunologia
RESUMO: Vismia guianensis (Aubl.) Chosy, espécie vegetal típica de região amazônica, é utilizada
popularmente para tratar infecções da pele, como cicatrizante e purgativo. Investigou-se a
ação anti-Candida do extrato hidroalcoólico das folhas de V. guianensis (EHVG) in vitro, in
vivo e in silico. O EHVG foi obtido por maceração das folhas em álcool (70%), por 7 dias,
seguido por rotaevaporação e liofilização. O EHVG foi submetido a avaliação fitoquímica e a
caracterização cromatográfica por HPLC-UV e FIA-ESI-IT-MSn. A citotoxicidade do EHVG
foi avaliada pelas técnicas de MTT, vermelho neutro e pela determinação da atividade
hemolítica. A ação antifúngica do EHVG foi avaliada in vitro, para determinar a
concentração inibitória mínima (CIM) e fungicida mínima (CFM) utilizando linhagens
padrão de Candida albicans, C. glabrata e linhagens clínicas de C.albicans. Avaliou-se
também os efeitos do EHVG sobre os principais fatores de virulência incluindo ação sobre: a
adesão fúngica, biofilmes jovem e maduro e a cinética de crescimento fúngico. Em outro
grupo de experimentos, determinou-se a ação do extrato sobre as enzimas proteolíticas, em
cepas de Candida albicans sensíveis Ca(S)Flu ou resistentes Ca(R)Flu ao Fluconazol, e o
efeito sinérgico do EHVG associado a Anfotericina B e ao Fluconazol. A avaliação in vivo
determinou a sobrevida de camundongos Swiss, fêmeas, imunosuprimidos com
ciclofosfamida, 48 horas antes da infecção letal por C. albicans (3x108), que foram tratados
com EHVG (5mg/kg), em seguida a infecção, ou 6 horas depois. Para análise in silico, por
docagem molecular e simulações por dinâmica molecular, selecionou-se a enzima CaCYP51
de C. albicans como alvo de quatro compostos identificados no EHVG. Nesse ensaio o
Posoconazol foi usado como controle positivo. Foram identificados na triagem fitoquímica do
EHVG catequinas, saponinas, antocianinas, antocianidinas, benzoquinonas e flavonóides e a
caracterização química do EHVG, permitiu identificar como compostos majoritários:
vismiona D, antraquinona F, kaempeferol, quercetina e ácido elágico. O EHVG apresentou
baixa citotoxicidade, nas várias concentrações testadas e inibiu, eficientemente, o
crescimento tanto das formas planctônicas como dos biofilmes jovens e maduros de C.
albicans e C. glabrata. O EHVG apresentou sinergismo com Fluconazol e com Anfotericina
B, quanto a ação anti-Candida, sendo efetivo até mesmo para o isolado clínico resistente ao
fluconazol (Ca(R)Flu). Animais tratados com EHVG, em qualquer intervalo, apresentaram
melhor sobrevida e maior expectativa de vida, com eficácia semelhante as drogas padrão. Na
análise in silico os 4 compostos testados apresentaram afinidade com a enzima CaCYP51,
mas a Vismiona D apresentou melhores resultados quanto a afinidade, sendo inclusive
superior ao Posoconazol. Conclui-se que o EHVG apresenta atividade anti-Candida, in vitro
e in vivo, confirmando os ensaios in silico, possivelmente porque é capaz de inibir
mecanismos de virulência de Candida albicans e C. glabrata, sendo efetivo até mesmo em
linhagem de C. albicans resistente ao Fluconazol. Conclui-se, também, que a ação anti-
Candida, pode estar relacionada a combinação de pelo menos 4 compostos químicos
presentes no extrato, sendo vismiona D o mais efetivo deles. Em conjunto, os dados mostram
que Vismia guianensis é um importante alvo para a bioprospecção de novas drogas com ação
anti-Candida.
MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 306484 - ROSANE NASSAR MEIRELES GUERRA LIBERIO
Interno - 965.677.243-15 - AFONSO GOMES ABREU JÚNIOR - UNICEUMA
Interno - 2250598 - MARIA DO SOCORRO DE SOUSA CARTAGENES
Externo à Instituição - ELIZABETH SOARES FERNANDES - UNICEUMA
Externo à Instituição - ROBERTO NICOLETE - FIOCRUZ