Banca de QUALIFICAÇÃO: ARTHUR HENRIQUE MENDES COLASSO
2021-08-11 08:21:54.008
Uma banca de QUALIFICAÇÃO de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: ARTHUR HENRIQUE MENDES COLASSO
DATA: 20/08/2021
HORA: 14:00
LOCAL: On-line
TÍTULO: PERFIL DE VIRULÊNCIA DE UM ISOLADO CLÍNICO DE Escherichia coli UROPATOGÊNICA PRODUTORA DA SERINOPROTEASE Pic.
PALAVRAS-CHAVES: Pic; Infecção urinaria; citotoxicidade; biofilme; Adesão.
PÁGINAS: 42
GRANDE ÁREA: Ciências Biológicas
ÁREA: Microbiologia
RESUMO: A infecção do trato urinário (ITU) é caracterizada pela presença de microrganismos
que invadem os tecidos urinários, com presença de bactérias na urina em quantidade
igual ou superior a 105 UFC/mL, sendo causada principalmente por enterobactérias,
dentre as quais se destaca a Escherichia coli uropatogênica (UPEC), devido à
presença de diversos fatores de virulência, a exemplo da produção de serino
proteases. Em bactérias Gram-negativas, as proteases pertencentes à família
Enterobacteriaceae são conhecidas como SPATEs (Serino protease autotransporter
of Enterobacteriaceae). Dentre as SPATEs, a proteína envolvida na colonização (Pic)
tem grande relevância e é produzida tanto por patótipos de E. coli como por Shigella
flexneri e Citrobacter rodentium. Pic é descrita na literatura por causar
hemaglutinação, degradar mucina, clivar moléculas do sistema complemento, dentre
outros. Desta forma, este trabalho tem como objetivo avaliar o perfil de virulência de
uma cepa de UPEC produtora da serinoprotease Pic isolada de um paciente com
diagnóstico de ITU. No período de dois meses foram coletadas amostras de ITU para
realização do perfil de sensibilidade aos antimicrobianos, seguido de PCR para
caracterização de genes de virulência associados à produção de SPATEs. Das 369
amostras analisadas no estudo, a cepa ITU32 foi selecionada por possuir apenas o
gene pic, dentre os genes de SPATES pesquisados. Foi realizada uma cinética de
crescimento bacteriano por um período de 8 horas e a capacidade deste isolado
formar biofilme foi avaliada utilizando a técnica do cristal violeta. A citotoxicidade em
células epiteliais também foi avaliada utilizando a linhagem HEp-2. Foi realizada PCR
para os genes ehaABDJ, pic, tibA, espC e espP. O teste de sensibilidade de ITU32
indicou resistência a antibióticos utilizados em quadros de ITU, sendo estes a
ampicilina, ampicilina/sulbactam, piperacilina/tazobactam, dentre outros. A presença
do gene pic pode estar relacionado a capacidade de UPEC degradar muco e promover
a colonização na mucosa do trato urinário. O crescimento bacteriano da cepa ITU32
foi estatisticamente igual a cepa produtora de biofilme 042 levando a supor que a
expressão de genes não interfere no tempo de crescimento bacteriano entre as
amostras. Os testes realizados demonstraram que a cepa ITU32 produziu um biofilme
caracterizado fraco, demostrando que a habilidade de virulência da amostra não está
diretamente relacionada à formação de biofilme. A cepa ITU32 também causou uma
baixa citotoxicidade frente as células da linha HEp-2. Em resumo este estudo
demonstra que cepas de UPEC tem expressado genes de virulência característicos
de EAEC como pic. Novos ensaios estão em fase de conclusão com o objetivo de
compreender o papel destas serinoproteases nas infecções urinárias e com isso
buscar novos mecanismos para tratamento destas complicações.
MEMBROS DA BANCA:
Interno - 407707 - CONCEICAO DE MARIA PEDROZO E SILVA DE AZEVEDO
Interno - 704.101.861-04 - EDUARDO MARTINS DE SOUSA - UNICEUMA