PPGCS/CCBS

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: JOÃO LUCAS DA SILVA CARVALHO
DATA: 17/12/2025
HORA: 14:00
LOCAL: Sala 01 do PPGCS (Sessão pública)
TÍTULO: CARACTERIZAÇÃO DA INIBIÇÃO DA PROTEÍNA DISSULFETO ISOMERASE INTRACELULAR COMO UM MECANISMO INIBIDOR DA AGREGAÇÃO PLAQUETÁRIA
PALAVRAS-CHAVES: agentes antitrombóticos; peptídeos de penetração celular; oxido-redução; agregação plaquetária; proteína dissulfeto isomerase.
PÁGINAS: 57
GRANDE ÁREA: Ciências da Saúde
ÁREA: Medicina
RESUMO: Investigadores têm atribuído crescente importância ao papel de mecanismos redox na ativação e na função plaquetária, especialmente devido à presença de proteínas contendo motivos tiólicos nas vias de sinalização que regulam a adesão e a agregação. Entre essas proteínas, destaca-se a proteína dissulfeto isomerase (PDI), que está presente tanto na superfície quanto no interior das plaquetas, modulando a ativação da integrina αIIbβ3 e contribuindo para a formação do trombo. Estudos anteriores do nosso grupo demonstraram que o peptídeo sintético CxxC, contendo o motivo catalítico CGHC presente na PDI, é capaz de inibir sua atividade redutase e de reduzir a agregação plaquetária induzida por agonistas como ADP, em um processo dependente da associação do peptídeo com a PDI de superfície. Nesse contexto, o presente trabalho teve como objetivo desenvolver e caracterizar um derivado penetrante do CxxC (CP-CxxCpep), avaliando sua estrutura secundária, sua capacidade de inibir a atividade da PDI e seus efeitos funcionais sobre a agregação plaquetária. Para isso, sintetizou-se um peptídeo contendo a sequência penetrante CP acoplada ao motivo CxxC. A conformação estrutural foi analisada por dicroísmo circular, enquanto a atividade redutase da PDI foi avaliada por ensaio de precipitação da cadeia β da insulina reduzida por DTT. Adicionalmente, investigaram-se os efeitos dos peptídeos na agregação plaquetária induzida por colágeno em plasma rico em plaquetas. Os resultados mostraram que o CP-CxxCpep apresentou maior conteúdo de hélice α em comparação ao CxxCpep, indicando que a sequência CP conferiu maior ordenamento estrutural ao peptídeo. Nos ensaios bioquímicos, ambos os peptídeos inibiram a atividade redutase da PDI, sendo que o CP-CxxCpep promoveu redução mais acentuada da precipitação de insulina, sugerindo interação estrutural favorecida com a enzima. No modelo de agregação plaquetária, tanto o CxxC quanto o CP-CxxCpep reduziram significativamente a agregação induzida por colágeno na concentração de 30 μM, evidenciando que a modificação estrutural do CP-CxxCpep não comprometeu sua capacidade antiagregante. A ausência de efeito superior do CP-CxxCpep pode estar relacionada ao curto tempo de incubação dos peptídeos (10 min), possivelmente insuficiente para permitir sua internalização e atuação plena em compartimentos intracelulares dependentes de PDI, resultando em efeitos predominantemente de superfície semelhantes aos observados para o CxxC. Em conjunto, os achados demonstram que a adição da sequência CP aumenta a organização estrutural do peptídeo sem prejudicar sua interação com a PDI ou sua capacidade de modular a agregação plaquetária. Esses resultados fortalecem a aplicação de peptídeos contendo motivos CxxC como moduladores da PDI e reforçam o potencial do CP-CxxCpep como plataforma para o desenvolvimento de novos inibidores redox direcionados à função plaquetária e a processos trombóticos.
MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 1371422 - ANTONIO MARCUS DE ANDRADE PAES
Interno - 221.758.778-17 - LUCAS MARTINS FRANCA
Externo ao Programa - 2914562 - SAMIRA ABDALLA DA SILVA