PPGCS/CCBS

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: ELYJANY MORAIS LIMA SENA
DATA: 08/04/2014
HORA: 08:30
LOCAL: SALA 1 - PPGCS
TÍTULO: Investigação da atividade antiagregante in vitro de peptídeos inibidores da dissulfeto isomerase protéica
PALAVRAS-CHAVES: Difosfato de adenosina, Agregação plaquetária, Compostos de sulfidrila, Plaquetas.
PÁGINAS: 49
GRANDE ÁREA: Ciências Biológicas
ÁREA: Fisiologia
RESUMO: A Proteína dissulfureto isomerase (PDI) desempenha um papel na agregação de plaquetas, visando proteínas de superfície contendo tiol em ambas as vias de ADP - dependentes e independentes. Nós já mostramos que um peptídeo de doze resíduos (CxxC), contendo o motivo catalítico da PDI , foi capaz de provocar diminuição da atividade redutase da PDI . Aqui, buscou-se investigar se o peptídeo CxxC é também capaz de inibir a agregação plaquetária in vitro. O plasma rico em plaquetas (PRP), obtido a partir de dadores saudáveis, foi incubado com CxxC durante 10 min antes da adição de ADP (5M) ou epinefrina (6M), de modo que depois o traçado de agregação foi observado durante cinco minutos. Como controles , scrambled (Scr) ou controle (AxxA, sem cisteína) peptídeos foram testados em condições semelhantes. Os agentes anti-PDI, tais como bacitracina, DTNB e anticorpo anti-PDI também foram testados afim de validar o sistema. Todos os dados de refletiram pelo menos três experiências independentes. Os agentes anti-PDI inibiram os efeitos de ambos os agonistas ADP e epinefrina em plaquetas. O peptídeo CxxC dependente da dose, reduziu a agregação de plaquetas induzida por ADP a uma média de 17 , 27 e 30 % em concentrações respectivas de 3, 10 e 30 M , enquanto que o anticorpo anti-PDI ( 1:250 ) diminuiu em 50%. Scr nem AxxA não tiveram efeito. Nenhum dos peptídeos interferiu com agregação induzida por epinefrina. Uma vez configurado o papel inibidor do peptídeo CxxC sobre a agregação plaquetária em PRP, realizamos estudos in silico para identificar os possíveis sítios de ligação deste com a PDI. A avaliação foi realizada através de um programa de modelagem molecular, o software AutoDock Vina. Inicialmente, buscamos localizar o sítio de ligação dos peptídeos CxxC, Scr e AxxA e, para tanto, utilizamos o conjunto dos domínios a, b, b’, x e a’. Os dados mostrados deixaram claro que ambos os peptídeos contendo cisteínas ativas são capazes de interagir com o sítio catalítico CGHC do domínio a e que a interação com o peptídeo CxxC possivelmente ocorre pela formação de uma ponte dissulfeto enquanto o Scr não apresentou aproximação suficiente para a formação de ponte. Tomados em conjunto, nossos dados sugerem que CxxC pode direcionar tióis/ditióis na própria PDI ou em outros substratos associados na superfície das plaquetas reforçando a perspectiva de utilização do peptídeo CxxC como potencial agente antiagregante.
MEMBROS DA BANCA:
Externo à Instituição - LÍDIO GONCALVES LIMA NETO - UNICEUMA
Externo ao Programa - 3098772 - RAIMUNDO ANTONIO GOMES OLIVEIRA